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2019檢驗(yàn)師復(fù)習(xí)資料:淋巴細(xì)胞的分離

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  2019檢驗(yàn)師復(fù)習(xí)資料:淋巴細(xì)胞的分離

  1)純淋巴細(xì)胞群的采集:利用單核細(xì)胞在37℃和Ca2+存在時(shí),能主動(dòng)粘附在玻璃、塑料、尼龍毛、棉花纖維或葡聚糖凝膠的特性,從單個(gè)核細(xì)胞懸液中除去單核細(xì)胞,從而獲得純淋巴細(xì)胞群。主要的方法有:①粘附貼壁法;②吸附柱過濾法;③磁鐵吸引法。

  2)淋巴細(xì)胞亞群的分離原則:選擇純化所需細(xì)胞的方法是陽性選擇法,而選擇性去除不要的細(xì)胞,僅留下所需的細(xì)胞為陰性選擇法。常用的方法包括:①E花環(huán)沉降法;②尼龍毛柱分離法;③親和板結(jié)合分離法;④磁性微球分離法及熒光激活細(xì)胞分離儀分離法。

  (3)淋巴細(xì)胞的保存與活力測定

  ①短期保存技術(shù):短期保存可置于4℃保存。

 �、陂L期保存技術(shù):液氮深低溫(-196℃)環(huán)境保存細(xì)胞,加入二甲亞砜作為保護(hù)劑。

 �、刍盍y定:最簡便常用的為臺(tái)盼藍(lán)染色法,呈藍(lán)色。

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